1 適用范圍
本標準規定了鑒別水樣致突變性的蠶豆根尖微核試驗法。
本標準適用于地表水、地下水、生活污水和工業廢水的致突變性鑒別。
2 規范性引用文件
本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是不注日期的引用文件,其有效版本適用于本標準。
GB/T 6920 水質 pH值的測定 玻璃電極法
HJ/T 91 地表水和污水監測技術規范
HJ/T 164 地下水環境監測技術規范
3 術語和定義
下列術語和定義適用于本標準。
3.1
微核 micronuclei
真核細胞中,游離于主核之外的小核即為微核,其物質構成和特性與主核一致,大小一般為主核 1/3 以下,是染色體畸變的一種表現形式。
3.2
微核率 micronucleus rate
某一試樣檢測若干根尖,每個根尖觀察1 000 個有絲分裂間期細胞,所計微核數占觀察細胞數的比率,以‰計。
3.3
有絲分裂指數 mitotic index
同一根尖觀察 1000 個細胞,處于有絲分裂期(包含前期、中期、后期、末期,見附錄 A 圖 A.1)的細胞數占總細胞數的比率,以‰計。
3.4
參比物質 reference substance
驗證測試方法敏感性和有效性的已知陽性對照物質,用于確定受試生物特性和試驗條件未發生明顯改變,保證試驗可靠有效。
4 方法原理
將經過浸種催根后長出的蠶豆初生根在試樣中暴露一定時間,經恢復培養、固定、染色后,制片鏡檢,統計蠶豆根尖初生分生組織區(參見附錄 A 圖 A.2)細胞微核率。致突變物可作用于細胞核物質,導致有絲分裂期染色體斷裂形成斷片、整條染色體脫離紡錘絲、紡錘絲牽引染色體移動的功能受損。這些移動受到影響的染色體斷片或整條染色體不能隨正常染色體移向細胞兩極形成子細胞核,而滯留細胞質中形成子細胞微核并引起其數量增加。比較試樣與空白試樣蠶豆根尖細胞微核率是否顯著增加,可判定樣品是否存在致突變性。
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